Анализ на дизентерию

Острые заболевания лечатся незамедлительно. Анализ на дизентерию должен удовлетворять критерию скорости. У взрослых и детей фиксируется и хроническая форма. Тогда проводится анализ кала на дизентерию. Можно это сделать в рамках анализа состава микрофлоры, как при дисбактериозе. Принцип выращивания аналогичный. Быстрый результат даёт наблюдение в микроскоп.

Проблема сдачи бактериологического анализа в уровне достоверности – не превышает 30-50%. Потому врач руководствуется клиническими симптомами. На дизентерию и сальмонеллёз определение заражения заключается в пристальном осмотре окрашенной пробы. Но кал не всегда даёт всходы. Тогда на дизентерию берут кровь с целью обнаружения антител. Проблема в формировании иммуноглобулинов с опозданием (3 дня)…

Что делать?

Недостаточная точность лабораторных исследований обусловлена характерной клинической картиной дизентерии в острых случаях. Исключение – синдром интоксикации, проявляемый отравлением. Бактериологическое исследование проводится из:

1. Кала.
2. Рвотных масс (при наличии).

Метод высевания занимает время, а дизентерия не длится долго. Проходит за неделю. Этого хватает, чтобы палочки дали всходы на питательной среде. Типичный протокол предусматривает отведение пятидневного срока на мероприятие (invitro.ru/analizes/for-doctors/571/17420/).

В школе учат: от кишечных инфекций ежедневно умирает 2100 детей. При беременности маме рассказывают, как опасно не мыть руки перед едой. Точность результата невысока. Но посев остаётся одним из вариантов.

Некоторые методики лабораторного анализа

Для заражения достаточно попадания внутрь организма человека менее 100 бактерий. Диагностика осуществляется 2 методами:

• бактериологическим;
• серологическим.

3-кратный бакпосев шигеллы на питательную среду при последующем исследовании даёт точность диагноза 40-60%. Экспресс-анализ кишечных инфекций проводится без выведения культур. Материал исследуется на наличие специфичных антигенов, токсинов. Пробы берутся из мочи, слюны, выделений ануса, крови. Применяются иммунологические методики, наделённые повышенной чувствительностью и избирательностью:

• иммуно-ферментный анализ (ИФА);
• иммунофлуоресценции (РИФ);
• реакция агглютинации латекса (РАЛ);
• полимеразной цепной реакции (ПЦР);
• реакции коагглютинации (РКА).

Проблема заключается в выпуске реактивов, индикаторов. Российскими предприятиями изготавливается спектр продукции для идентификации биопродуктов шигеллы Зонне.

Антитела крови распознаются в реакции пассивной (непрямой) гемагглютинации. Методы легли в основу исследовательских наборов, выявляющих шигеллы Флекснера, Флекснера-6, Зонне. В ходе процесса исследуются парные сыворотки, взятые в начале заболевания и через 1 неделю. Прочее выполняется согласно инструкции, идущей в комплекте. Положительный результат засчитывается при изменении плотности антител между пробами от 8 раз.

При попытках поставить этиологический диагноз по острой дизентерии на основании 4-кратного изменения титра возникают систематические ошибки. Результат РИГА сопоставляется с эпидемической обстановкой. Одновременно учитывается предполагаемый срок заболевания, особенности течения. Титр не должен быть ниже 1:400. Недостаточная чувствительность обусловливает нецелесообразность использования метода для выявления дизентерии.

При нетипичном развитии заболевания врач прописывает визуальный осмотр толстой кишки. Согласно стадиям развития заболевания выделяются внешние признаки – катаральные, геморрагические, язвенные, некротические, фиброзные. При хроническом течении часто фиксируется атрофия эпителиального слоя.

Иногда диагноз выставляется при вспомогательном изучении внешнего вида испражнений. Распознают выраженное поражение дистального отдела толстого кишечника по обилию слизи (лейкоцитов). Обнаружение эритроцитов говорит о наличии кровоизлияний.

Бактериологический посев

Преимущество бактериологического посева в определении подходящего антибиотика. Выращиваются шигеллы – неподвижные (в отличие от эшерихий и сальмонелл) грамотрицательные палочки длиной 23 микрон, шириной 0,6. Бактерии анаэробные, способны существовать в кислородных средах.

Делается от 3 проб. Такой анализ в большей части случаев даёт правильный результат. Для высевания подходит любая среда. Шигелла – универсальный микроб. Штамм образует S-колонию, за исключением Зонне, разрастающемся в R-колонию.

В процессе роста не образуются ферменты, среда кислая. Шигеллу Зонне отличают по способности медленно расщеплять сахарозу и лактозу. Прочие штаммы различить по биохимическим признакам не представляется возможным. Для дифференциации рассматриваются экспрессированные на оболочке антигены. По структуре они напоминают представленные на кишечных палочках. Шигеллы могут образовывать с патогенными эшерихиями ассоциации.

Бакпосев взращивается несколько дней. Лабораториям требуется 5 суток. Назначается лечение – врач руководствуется клиническими проявлениями заболевания. Стоит удовольствие от 700 рублей.

При сборе фекалий старайтесь не захватывать кровь. При невозможности немедленного высевания проба кала консервируется в глицериновой смеси, либо растворе фосфорнокислых солей.

Биохимический анализ кала

В зарубежной практике осознали: ждать 5 дней опасно, учитывая процент смертей (до 40%). Учёные ищут токсины Шига. Яды выделяет даже атипичный штамм кишечной палочки. При дизентерии исследуется кал на признаки токсина.

Штамм кишечной палочки STEC – в научной среде О157 – ответственен за большую часть эпидемических вспышек. В 2011 году привёл к смерти 32 немцев. На долю STEC приходится до трети случаев кишечных инфекций. Пути заражения, клинические признаки напоминают дизентерию. Атипичные штаммы кишечной палочки имеют значение.

Сдавать кал нужно в начале болезни. В последующем становится сложно обнаружить токсин. Метод исследования дополняет бакпосев, серологический анализ на антитела. Для дифференциации с кишечной палочкой применяются электрофорез. С целью идентификации токсинов Шига 1 и 2 используется метод генного ПЦР копирования.

Цитотоксин Шига вырабатывается преимущественно Shigella Dysenteriae. Указанное исследование не всегда подходит для выявления дизентерии.

Серологический анализ

Через 3 дня организм начинает избавляться от дизентерии. Иммунная система формирует антитела (находятся в крови). В ходе исследования используется реакция пассивной гемагглютинации. Метод дополнителен при дизентерии – лабораторная проверка отрицательного результата, выданного диагностикой при помощи бакпосева. Серологический анализ хорош при запоздалом обращении пациента к врачу.

Антитела в крови исчезают через 2-3 года. Вспышка заболевания зарегистрирована через значительный промежуток времени. Минус методики – сложность выявления дизентерии при затяжном характере. Плотность антител падает. В результате процент тестов снижается до 40-30%. В начальной стадии даётся правильный ответ в исследовании до 80% случаев.

Обходят проблему повторным сбором анализа:

1. При обращении пациента.
2. Через неделю.

Достоверность результата оценивается по скорости изменения плотности антител в сыворотке. Положительный диагноз ставится при восьмикратном изменении. Антигены появляются в моче – могут фиксироваться соответствующим анализом.

Кожная проба

Токсический шок вызывает специфического рода высыпания на коже. В ослабленном болезнью организме достаточно появления дополнительно вводимого вещества для наблюдения реакции (гидролизат дизентерийных бактерий). Он в обилии содержит нужный токсин. Проба в количестве 0,1 мл вводится под кожу, в течение суток наблюдается реакция (как с Манту).

Общая картина исследований

На карантине врачи занимаются причиной возникновения ситуации. За прошедшие 3 столетия больше умирало от дизентерии бойцов, нежели в период сражений. В период Первой мировой войны сильно страдала немецкая армия в Восточной Африке. На 1000 солдат приходилось 277 больных дизентерией. Кишечные инфекции – гроза будущих гитлеровцев.

Помимо крови, мочи и кала исследуется визуально задний проход. Это копрологический метод. Бактериологическое исследование производится на основе:

1. Продуктов, местной воды – чтобы установить источник заразы.
2. Трупов пациентов.
3. Промывных вод желудка.

Материалы хранятся в холодильнике до суток. Для сбора фекалий применяется деревянная, стеклянная палочка. Под бактериологический посев берутся среды Плоскирева и Эндо (реже Левина). Повышение всходов обеспечивается добавками Левомицетина, Синтомицина. Селенитовая среда используется для повышения продуктивности шигелл Зонне. Онаслужит для высевания рвотных масс, промывных вод.

Штамм выращивается при температуре 37 градусов Цельсия в течение 20 часов. На второй день колонии высевают на среду Ресселя. Для дифференциации используется внешний вид штамма:

1. Всходы шигелл бесцветные, мягкие, правильной круглой формы, диаметром от 1 мм.
2. Штамм Зонне грубый на вид, с изрезанным периметром.

Среда Ресселя содержит углеводы, по изменению собственного цвета позволяет судить о засеянной микрофлоре. Проводится дифференциация между штаммами шигелл Флекснера, атипичной кишечной палочкой, сальмонеллами. На третий день берётся кровь, начинается оценка результатов по питательным средам (внешний вид, цвет). Кал содержит много бактерий. Выбираются штаммы по внешнему виду похожие на шигеллы, по активности в отношении углеводов. Штамм Зонне расщепляет лактозу и сахарозу с образованием кислой среды, но процесс медленный.

Пристальное внимание уделяется неподвижным палочкам, не расщепляющим мочевину. Что касается шигелл Зонне, они ферментируют лактозу медленно. Для окончательной дифференциации штаммов используют прочие питательные среды: Гисса, Клиглера, мясопептонный агар, Симмонса, Кристенса. Аминокислоты некоторыми штаммами расщепляются до индола.

Антитела ищут по иммунологическим реакциям, подкрашивают для наблюдения в микроскоп. Визуальное исследование кишечника проводится в виде дополнительной меры, позволяющей оценить степень патогенных изменений. Полезно визуальное наблюдение кала.

Дифференциация прочих заболеваний

Чтобы назначать дизентерийный бактериофаг, врач должен убедиться в диагнозе. Целая группа кишечных инфекций даёт аналогичные симптомы. Это сальмонеллёз, холера, отравление, диарея. Лечение и симптомы мало связаны между собой. Главенствующая роль отводится анамнезу – что предшествовало заболеванию. Так удаётся выявить факторы, позволяющие думать на отравление. Носительство бактерий проверяется лабораторными исследованиями.

Вакцинация

Россияне уверены: прививка от дизентерии – лучшее средство… Сведений об этом в мировом интернете нет. Дезинфекция может предотвратить заражение. Дизентерийные вакцины в стадии разработки. Есть шансы испытания препаратов на россиянах.

Создание вакцины – решаемая задача лабораторий мира. Учёные уверены: опасность дизентерии сильно преуменьшена, новые виды тестов выявляют солидные цифры. Исследования показывают, что повторные заболевания дизентерией встречаются реже, нежели первичные. Это рычаг, которым ВОЗ хотят перевернуть Земной шар.

Специфика штаммов едва ли позволит создать единственное лекарство на все случаи жизни. Медики надеются прививать виды отдельно: Флекснера 2а, 3а, 6 и Зонне. Механизм прививки изучается на примере кератоконъюктивита у морских свинок, воспалении лёгких у мышей. Планируются исследования на людях. Направления движения лабораторий:

1. Ослабленные формалином мёртвые клетки.
2. Антигены.
3. Гликоконъюгат.